IdeS酶试剂盒
产品概述
抗体类药物开发的关键点和难点之一，在于如何全面表征抗体药物的关键质量属性。选择合适的工具酶可以快速、准确地分析抗体片段的结构。传统方法用胃蛋白酶或木瓜蛋白酶进行抗体切割，需要不断反复摸索酶切条件，且这类酶易自消化，酶切特异性差。相较于前二者，IdeS蛋白酶作为新一代工具酶，在特异性和消化时间方面有明显提高，可广泛应用于抗体类药物的制备和结构表征分析。
IdeS蛋白酶是仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG以产生F（ab'）2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶，见图1。
图1 IdeS酶切割位点
本公司的IdeS酶是利用E.coli系统重组表达生产而得。开发的IdeS酶试剂盒在保证灵敏度和重复性的前提下，可在30 min内迅速将抗体、Fc融合蛋白、ADC完全片段化，完美解决竞品酶切时间长，切割特异性差，酶切过度或者酶切不完全的情况。试剂盒的配套Buffer可实现色谱、质谱的完全兼容。此外，本IdeS酶试剂盒与PNGase F酶试剂盒结合使用，可实现样品蛋白的完全断裂和去糖基化，有助于对样品进一步的深度表征。综上，本IdeS酶试剂盒可应用于抗体、Fc融合蛋白、ADC类药物的结构表征分析，在克隆选择、生产监控、质量控制、稳定性测试等环节发挥重要作用。
适用范围
抗体、Fc融合蛋白、ADC的亚基分子量分析；
ADC药物的DAR值分析；
亚基翻译后修饰、糖型分析。
产品特点
1. 高比活性：IdeS酶试剂盒能在30 min内快速且有效切割抗体铰链区下方特定位点，获得F(ab’)2和Fc片段。
2. 高纯度：IdeS酶利用大肠杆菌重组表达，纯度≥95%，无动物源性，无外源性的病毒污染，无非特异性蛋白酶污染。
3. 高稳定性：IdeS酶试剂盒在标示的保存条件下可以保持2年稳定性，确保其在实验中的可靠性和重复性。使用时可多次反复冻融，酶活不受影响。每批产品都经过严格的质量控制，以实现产品批间稳定性。
4. 广泛的底物特异性：IdeS酶试剂盒除对人IgG、猴、兔、羊IgG有良好的酶切活性外，还对相应的Fc融合蛋白、ADC具有特异性酶切活性。
合规性
试剂盒的生产过程参照GMP要求进行；
试剂盒的质量控制参照GMP要求进行；
每一批次均有COA文件可溯源，适用于GMP质量控制实验。
订购信息
性能评价
1. 单抗样品经本公司IdeS酶试剂盒处理后，得到了完整的Fc/2和F(ab’)2片段。
图2 单抗样品经IdeS酶解后的原始质谱图
图3 单抗样品经IdeS酶解后的分子量谱图
2. Fc融合蛋白样品经本公司IdeS酶试剂盒处理后，得到了完整的Fc/2和F(ab’)2片段，证明本试剂盒同样适用于Fc融合蛋白的亚基分析。
图4 Fc融合蛋白样品经IdeS酶解后的原始质谱图
图5 Fc融合蛋白样品经IdeS酶解后Fc/2的分子量谱图，F(ab’)2因糖基化程度高，质谱信号异质性强，因此不解卷积
3. 抗体样品经本公司IdeS酶试剂盒以及PNGase F酶试剂盒联合处理后，得到了完全去糖基化的Fc/2和F(ab’)2片段，证明了本公司多个试剂盒联用进行深度分子量分析的可行性。
图6 抗体样品经IdeS酶试剂盒以及PNGase F酶试剂盒联合处理后的原始质谱图
图7 抗体样品经IdeS酶试剂盒以及PNGase F酶试剂盒联合处理后的分子量谱图