泳拓生物新型CIEF蛋白增溶剂(SoluPro)
成像毛细管等电聚焦 (iCIEF) 是一种评估电荷异质性的标准方法,电荷异质性是在治疗性蛋白的开发和生产过程中用于监测质量和一致性的关键质量属性之一。然而,在等电聚焦(IEF)过程中,蛋白质可能发生聚集和(或)沉淀,导致峰图不可重现。尿素是一种有效的用于减弱这种聚集和沉淀的蛋白质增溶剂,但尿素溶液必须在使用之前新鲜配制,这增加了样本分析额外的步骤和时间。此外,尿素诱导的氨甲酰化反应和阳极梯度迁移会引起明显的pI值偏移。最后,大于4M尿素还会导致蛋白变性。
评价蛋白质电荷异质性为什么要加增溶剂?
评价蛋白质的电荷异质性,是蛋白质药物开发和生产过程中,作为其质量和一致性的关键评价指标。但是,等电聚焦过程中可能会发生蛋白质聚集或沉淀(导致峰图不可重现)。因此,往往使用尿素作为蛋白质增溶剂,可以减轻IEF分析过程中的聚集和沉淀。
使用尿素作为增溶剂有哪些弊端?
尿素溶液需要现配现用,这导致在样品分析中增加了额外的步骤和额外的时间。
高浓度尿素容易析出阻塞毛细管。
可能引起氨基甲酰化,阳极梯度漂移从而导致明显的pI值改变,尿素水平超过4M可引起变性。
如何改善传统增溶剂带来这些弊端?
SoluPro作为泳拓生物新研发的增溶剂:
1. 比尿素更稳定,无需每次新鲜配置,SoluPro可有效溶解iCIEF的蛋白质,其稳定性与尿素相比,更胜一筹,并且与 iCIEF上的吸光度和天然荧光检测兼容,所以无需每次新鲜配置,减少了研究人员额外的工作步骤和时间。
2. 对pH梯度形成影响更小,相对于尿素,蛋白质峰的pI值更稳定。
3. SoluPro的粘度跟水的类似不易造成毛细管的堵塞。
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